[推薦]生物實驗報告
在不斷進步的時代,需要使用報告的情況越來越多,報告中涉及到專業性術語要解釋清楚。你知道怎樣寫報告才能寫的好嗎?下面是小編幫大家整理的生物實驗報告,歡迎閱讀與收藏。
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生物實驗報告1
醫學生物化學是一門為醫學院各專業開設的主干課程,是聯系基礎醫學與臨床醫學的重要學科,在醫學教學中具有重要作用。醫學生物化學實驗是一門可以自成體系,有其豐富的理論、技術內容的課程,在醫學生物化學教學中占有突出的地位,它不僅可以以生動形象的實驗現象幫助學生加深掌握醫學生物化學的理論知識,更重要的是讓學生掌握實驗中的各種技術的基本原理,掌握常規實驗儀器的主要性能與操作方法,培養學生在實驗過程中發現問題、思考問題、分析問題和解決問題的能力。
一、傳統的醫學生物化學實驗教學的弊端
我們以前進行的生物化學實驗,其實驗內容和考核方法都有弊端。
1.實驗內容弊端。我們以前給學生開設的實驗基本上都是驗證性實驗,一般是理論課講述了相關知識,接著安排這個知識點的實驗課。例如,理論課講述了蛋白質的理化性質,這次實驗課的內容就為“蛋白質的沉淀凝固”。課本上的理論都是前人的實驗結果,對于這樣的實驗學生認為缺乏挑戰性,實驗操作中也不主動思考。醫學生物化學實驗課程的驗證性實驗太多,不能很好地發揮學生的主觀能動性,也不利于學生思維能力和創造能力的培養。
2.考核方法的弊端。我們以前的醫學生物化學實驗考核成績主要是學生的實驗報告,忽略了學生在寫實驗報告的過程中存在抄襲現象。有的學生實驗操作能力很差,抄襲別人的實驗報告也可得高分。這種考核標準導致學生不重視實驗過程,只注重實驗報告的書寫,不利于培養學生的動手能力,不利于培養學生分析問題和解決問題的能力。
二、生物化學實驗教學改革
1.構建新的實驗教學內容。對實驗項目進行改革。我們以前醫學生物化學實驗內容:生物化學實驗的基本知識與基本技能、蛋白質的沉淀和凝固、雙縮脲法測定蛋白質的含量、還原糖含量的測定、氨基酸紙層析、尿淀粉酶活性的測定、血清尿素氮含量的測定、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳、DNA的提取與鑒定、丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用等。改革后的實驗內為:蛋白質含量的'測定(考馬斯亮藍法)、氨基酸紙層析、酶促反應動力學實驗、丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用、葡萄糖含量的測定(葡萄糖氧化酶法)、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳、組織DNA的提取與鑒定、堿性磷酸酶提取與鑒定等。經過對實驗項目的改革,去掉部分淘汰實驗和部分驗證性實驗,增加了分子生物學實驗比例,增加了綜合設計性實驗項目。
綜合設計性實驗,就是在實踐教學中,教師提出實驗的總體要求,讓學生自己設計實驗。學生先進行分組,實驗小組的各成員經過查閱文獻資料、設計實驗所用試劑儀器、設計實驗步驟、進行預實驗、制作幻燈片、小組課堂匯報這樣的程序完成整個綜合設計性實驗。實驗成功了,學生會有極大的成就感;如果有些實驗不成功,帶教老師進行引導,分析失敗原因,再重復實驗。這樣,每位學生在整個實驗中一直處于主體地位,避免了個別學生不動手操作、抄襲實驗報告等不良行為,從而達到培養學生的創新意識,以及學生的動手、動腦能力的目的。
2.自編生化實驗指導教材。我們以前所使用的實驗教材有的內容目前已淘汰,有的內容不適合醫學生,因此,我們參考了周愛儒主編的《生物化學》,藥立波主編的《醫學分子生物學》,趙亞華主編的《生物化學與分子生物學實驗技術教程》,劉吉民主編的《醫學生物化學與分子生物學實驗教程》等,結合我校的實際情況,編寫了《醫學生物化學實驗技術》實驗講義。對醫學生物化學實驗的基本實驗內容進行精心的取舍,保留經典的實驗內容如葡萄糖含量的測定、氨基酸紙層析、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳等外,增加了綜合設計性實驗如組織DNA的提取與鑒定、堿性磷酸酶的提取與鑒定實驗等的比例。這樣一方面學生可以掌握生物化學實驗的分光技術、層析技術、電泳技術等基本實驗技術,另一方面通過綜合設計性實驗培養學生的創新能力,提高學生的綜合素質。
3.讓學生自己準備實驗。傳統的生物化學實驗教學注重知識傳遞和操作能力的培養。上實驗時,老師先講實驗原理、操作步驟、可能出現的結果,準備好試劑,調試好實驗儀器,學生按部就班地操作即可,完全剝奪了學生的思維空間。讓學生自己準備實驗,學生可以全身心地投入到整個實驗的各個準備階段,例如試劑的配制、試劑的分裝、儀器的調試等,在準備的過程中會出現各種問題,學生們在老師的指導下就要去分析為什么會出現這些問題,如何去解決這些問題。學生自己準備實驗可以使學生獲得從書本上學不到的知識和能力,從實驗中得到更多的收獲。
4.先做后講。我們以前的實驗大多為驗證性實驗,一般是老師講完后學生再做,有時為了得到明確的實驗結果教師參與過多,學生對實驗印象不深。為此,我們決定采用先做后講的歸納式教學方法,這種方法更適用于綜合設計性實驗,讓學生一邊做實驗,一邊觀察討論,整個實驗做完后,讓學生總結規律,老師只做歸納性、提高式講解。這樣的教學方法可以引導學生感知知識的發生過程,體驗獲得真知的喜悅。
5.應用多媒體技術豐富實驗課教學。醫學生物化學這門課的知識很抽象,教師講課難度較大。多媒體技術通過文字、圖像、動畫和聲音等傳遞信息。應用多媒體技術進行醫學生物化學的教學,可以生動、形象地傳遞較多的知識,還可以幫助師生共同突破教學中的重點和難點,極大地提高教學質量。我們以前上實驗課時都采用黑板板書,操作也只做一些簡單的示范。由于班級人數較多,有一些學生看不到操作示范。現在我們把多媒體技術也運用在醫學生物化學實驗課堂上,教師把實驗原理、實驗試劑、實驗儀器、操作步驟等做成幻燈片,比板書看起來更清晰,把實驗操作也錄成視頻,做實驗前先看一段實驗操作步驟的錄像,然后再操作,避免了學生看不到操作示范,這樣可提高學生實驗動手能力。
6.開放實驗室。為了提高學生的實驗操作能力,我們決定進行實驗室開放,便于學生進行綜合設計性實驗的預實驗及學生參與教師科研的實驗。
(1)帶教老師給學生講解一些常用實驗儀器的使用方法及注意事項,例如:電子天平、臺式低速離心機、超低溫離心機、恒溫培養箱、水浴箱、電泳儀、烤箱、手提式不銹鋼消毒器、分光光度計、PCR儀等。由實驗技術人員管理、維護實驗室及其儀器。
(2)實驗室開放時間:周一到周五從18∶00~22∶00,周六、周日全天開放。帶教老師和實驗技術人員輪流值班,隨時解決學生實驗過程中的問題。
生物實驗報告2
年級班實驗人:組次:試驗時間:
一、探究目的
1、通過探究幫助學生理解樺尺蠖體色變化的整個過程。
2、理解保護色對生物生存的意義。
二、探究步驟
1、發現并提出問題:______________________________________。
2、作出假設:___________________________________________________ 。
3、制定計劃:
4、實施計劃:認真記錄和分析探究的`過程和結果和。
5、得出結論:_________________________________________________________ 。
6、表達交流。
三、討論
1、第一代和第二代之間有什么變化?
2、第一代和第五代之間又有什么變化?
3、你能推測保護色的形成過程嗎?從中你能簡單分析生物進化的原因嗎?
生物實驗報告3
【探究內容】
探究種子萌發的環境條件
【探究目的】
1、了解種子萌發需要的環境條件。
2、學會進行探究實驗的一般方法。
【探究器材】
種子100粒、5個能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個、餐巾紙10張、標簽紙5張
【探究過程】
提出問題:光的強弱會對種子萌發產生影響嗎?水的多少會對種子的萌發產生影響嗎?溫度的.高低會對種子萌發產生影響嗎?空氣的流通會對種子萌發產生影響嗎?
做出假設:光的強弱、水的多少、溫度的高低都會對種子的萌發產生一定的影響。
制定計劃:準備100顆綠豆種子,5個有蓋的瓶子,10張紙巾,5張便利貼。1號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,放在空氣流通,有陽光的地方;2號瓶的水不但能濕透紙巾,而且能把種子淹沒,放在空氣流通,有陽光的地方;3號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,用蓋子把瓶子蓋上,使瓶子空氣不能流通;4號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,放在冰箱里,盡量使瓶子里的水不結冰;5號瓶不放水,放在空氣流通,有陽光的地方。
實施計劃:每天都進行實驗并觀察5個瓶子有什么變化,再把每天的變化都紀錄下來。
分析結果:1號瓶大部分能發芽;2號瓶的種子皮破了,但不能發芽;3號瓶只有少許發了芽;4號瓶和5號瓶沒有發芽
得出結論:想要種子發芽,一定要有適宜的光度;需要適量的水分,溫度也要控制好,空氣的流通也有一定的影響,但影響沒有光度、水分和溫度大,相對來說,空氣流通的影響較小。
這個實驗很簡單,我們在做實驗要分以上幾步完成,就會很容易的完成實驗。
【交流與評估】
1、根據你的問題和假設,應當將種子分成幾組?XX每組應有多少粒種子?XX每組只有一粒種子可以嗎?
2、對照組應提供的溫度、水分、空氣等條件應該如何?
3、每個實驗組的處理,除了所研究的條件外,其他環境條件是否應與對照組相同?
生物實驗報告4
實驗生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定
一、實驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。
二、實驗原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的`顏色變化過程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡合物,這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此,蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ 染成紅色
三、實驗過程(見書P18)
四、實驗用品(見書P18)
五、注意
1.關于鑒定還原糖的實驗,在加熱試管中的溶液時,應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時試管口不要朝向實驗者,以免試管內溶液沸騰時沖出試管,造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么?
生物實驗報告5
前言:
生物化學實驗在整個生物化學教學體系當中發揮著重要的作用,能夠強化理論知識。并且在學生的動手能力和創新能力的培養方面有著非常大的優勢。但是,在我國目前的許多高校當中,生化實驗的課程仍然擺脫不了以教師為中心,重知識、重形式的傾向仍然非常的嚴重。并且在生化實驗中存在著大量的限制性的問題及其操作,這在一定程度上對學生的創造能力的發揮造成了不利的影響。因此,在新的教育體制之下,必須對生化實驗的教學進行改革,從而能夠適應時展的潮流。
1、生物化學教學當中存在的一些問題
在我國目前的生化實驗教學當中存在的問題主要包括以下四個方面的內容:
1.1教學手段的單一化:現行的生化實驗教學模式仍然照搬傳統的方式,即由實驗人員在實驗之前做好實驗的準備,實驗時老師對實驗的原理、步驟及其相關的注意事項進行講解和交代,之后學生再按著實驗指導書上的內容進行實驗。
1.2實驗內容比較的陳舊:實驗的內容主要是對上課所學的理論知識做一個鞏固,并沒有一些發散性思維的東西在里面,因而不利于學生實驗思維的發展。另一方面,實驗的內容大都受到了理論課得約束,實驗內容顯得比較的僵化,沒有什么聯系性,實驗的儀器也比較的落后,實驗方法簡單。
1.3實驗考試的模式不合理:學生的期末成績構成還是以平時成績為主,實驗的成績所占的分值比重比較的小,而且實驗成績主要是以實驗報告為主。而實驗報告中的實驗原理、實驗目的和實驗數據之間的抄襲現象比較的嚴重,因此一份簡單的實驗報告并不能夠真實的反應出學生的實驗能力和實驗數據的分析能力。
1.4大家對實驗課的重視程度不夠:在所有的課程當中,基本上都存在著重理論輕實踐的教學方式,生物化學也是如此。有的學生在做實驗的時候就是一種觀望的態度。這種輕實踐、重理論的教學培養方式抑制了學生的動手操作能力,也不利于學生創新能力的培養。
2生物化學實驗的改革措施
2.1對實驗內容進行改革:在生物化學實驗中,應該善于總結過去生化實驗的教學經驗,并且在這基礎之上對兄弟院校的優秀生物化學實驗內容進行吸收整合,并且對這些成果在充分論證的基礎之上結合自身的實際情況,重新制定實驗教學的內容。比如說某學校的生物化學實驗就是以分光光度技術、電泳技術、層析技術等生物化學實驗技術為基礎,在內容上包含了糖類、蛋白質、核酸等方面的內容,并且盡可能的選擇有多種技術相結合的實驗,這樣每一個學生都有動手的機會。另一方面,實驗的安排還應該考慮到學生基本技能的培訓,并且在學生的動手能力方面能夠發揮出一定的作用,其次還應該讓學生掌握一些常規儀器的使用方法及其注意事項,在簡單的基礎之上適當的增加一些復雜的內容。
2.2 對教學手段進行優化:在新的教育體制之下,實驗教學手段不能再以教師為中心,老師講什么,學生就做什么,這種教學模式肯定會影響學生的自主動手的能力。應該為生化實驗營造良好的氛圍,讓學生有著一定的發展空間,并且應該積極的鼓勵學生對實驗方案進行優化,在善于利用書本上的知識點的基礎之上再次進行深度的挖掘。
實驗案例:在影響酶促反應速度因素的實驗當中,在實驗指導書中用NaCl 和 CuS04作比較,這種比較方式只能夠反映出鈉離子或者氯離子為唾液淀粉酶的'促進劑,銅離子為唾液淀粉酶的抑制劑,但是卻不能更進一步的加以區分。經過同學們的討論研究,決定通過加入Na2S的方法進行對照。這樣就能使結果顯得更加的明確,即氯離子是促進劑,而銅離子是抑制劑。通過這種實驗方案的簡單修改,使得實驗結構顯得更加的合理,同時也使學生的思維能力和動手創新能力得到了顯著的加強。
2.3對考試方式進行改革:首先,實驗指導書上的實驗原理、實驗目的、實驗步驟等內容應該改為由學生來講解,這樣不僅能夠鍛煉學生的口頭表達能力,同時也能夠顯著的促進學生進行認真的實驗復習。之后,老師可以通過提問的方式,對實驗當中的注意事項及其有關的問題進行提問,通過這一步驟能夠使學生在實驗之前對實驗的過程有一個比較清晰的認識,同時讓學生能夠積極的思考,激發求知的欲望。在實驗的過程當中,老師應該仔細的觀察,對學生在實驗過程當中的一些錯誤操作進行及時的糾正,并且對錯誤進行分析。
最后,對生物化學實驗的實驗報告內容進行整合,擺脫以往的那種報告形式。實驗報告的第一部分內容可以對實驗進行綜合的概述,主要是對實驗原理、實驗目的、實驗步驟的敘述,這部分的內容不能夠從實驗指導書上進行照搬,而是應該用自己的語言進行敘述。第二部分的報告內容主要是包括實驗現象及其相關實驗數據的記錄,這部分的實驗數據要求科學嚴謹,而且不同組的學生的實驗數據應該是不一樣的。第三部分就是分析和討論部分了,第三部分是整個報告的關鍵部分,主要包括實驗當中出現的問題并且對問題的分析、實驗的改進及其討論等內容,這部分的內容還應該有著一些探索性的問題,引導學生進行實驗的分析,從而培養學生分析問題、解決問題的能力和創新的意識。
3、小結
綜上所述,本文簡單的對生物化學實驗教學當中存在的問題進行了分析,同時在如何通過生物化學實驗培養學生的創新意識方面提出了一些建議措施。
總之,生物化學實驗教學的改革是多方面的,老師應該根據學生及其學校條件的實際情況考慮,綜合選擇一條或者多條最佳的實驗教學方式,從而提高學生的創新意識。
生物實驗報告6
實驗: 練 習 使 用 顯 微 鏡
目的要求:
1、練習使用顯微鏡,學會規范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠將標本移動到視野中央,并看到清晰的圖象。
材料用具:
顯微鏡、e字玻片、動植物永久玻片、擦鏡紙、紗布
方法和步驟:
一、對照圖示認識顯微鏡,識別顯微鏡的結構及各部分的作用。
二、練習使用顯微鏡
1、取鏡和安放
右手握住鏡臂,左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
2、對光
轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。 把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,便于畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡,可以看到白亮的視野。
3、放置玻片標本
4、觀察 (先低后高)
把所要觀察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的`中心。 轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼 睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。 左眼向目鏡內看,同時反方向轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
5、收放
注意事項
1、注意安全,不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。
2、材料對準通光孔,用壓片夾將玻片壓好。
3、下降鏡筒時,不要注視目鏡,一定要注視物鏡,以免損壞玻片標本和物鏡頭。
4、取下玻片標本時要小心;
5、實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器,把兩個物鏡偏到兩旁, 1
并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進鏡箱里,送回原處。 思考回答:
1、在進行低倍鏡觀察時,使鏡筒下降至接近玻片的過程中,眼睛應注視什么地方?為什么?
2、光線較暗時,應選用反光鏡的平面還是凹面?
3、怎樣計算出視眼中的圖像的放大倍數?
4、若視眼中“e”位于左上方,怎樣操作才能將其移到視眼中央?
生物實驗報告7
實驗名稱:
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
一、實驗目的
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布
二、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的'葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態,觀察細胞質的流動,可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
四、實驗過程(見書P30)
1.制作蘚類葉片的臨時裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時裝片
4.用顯微鏡觀察細胞質流動
物理實驗報告 ·化學實驗報告 ·生物實驗報告 ·實驗報告格式 ·實驗報告模板
五、討論
1.細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動,為什么?
2.葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系?
3.植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態,這對于活細胞完成生命活動有什么意義?
4.用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
生物實驗報告8
醫學生物學是中醫院校的基礎課程,是一門實踐性很強的學科。實驗教學是醫學生物學教學過程中重要的組成部分,實驗教學效果的好壞直接影響課堂教學的效果和學生對醫學生物學的興趣。高年制的醫學生是各醫學院校重點培養的高層次醫學人才,因此,對他們的要求遠遠高于五年制學生,除了要求他們掌握全面扎實的專業知識外,還要求他們具有較高的科研素質、創新能力和實踐能力,進而全面提高高年制學生的綜合素質,培養學生分析問題、解決問題的能力。基于此,實驗教學改革成為我們教學的重點。筆者綜合分析目前我室的生物學實驗教學過程,除了基本的醫學生物學實驗外,還開設了現代生物學實驗技術課,這門實驗課主要包括細胞培養、細胞傳代和染色體顯帶等實驗;在進行觀察體外培養細胞的.基本形態這個實驗時,對該實驗進行幾個方面的改革,主要包括對實驗教學方法、實驗內容設計和實驗具體操作進行改進,經調查,改革后實驗教學效果較好。
一、實驗教學方法改革
觀察體外培養細胞的基本形態這個生物學實驗的目的有兩個:
一是掌握倒置顯微鏡的使用方法;
二是讓學生了解細胞的基本形態結構和體外培養細胞的生長狀況。
這樣,有助于學生理解細胞是生命有機體的基本結構單位。針對這個實驗目的,我們采用多媒體教學和國內外文獻教學相結合,從體外培養細胞的形態特征類型開始講解,結合不同細胞的圖片,逐步講解。同時,結合實物演示(培養瓶中裝有不同時間的培養細胞)給學生講解體外培養細胞的生長狀況和細胞培養中的污染情況,使學生對這個實驗先有感官認識,然后讓學生自己設計實驗。
二、實驗內容設計
在實驗內容設計過程中,我們首先對實驗室的實驗條件和經費進行考慮,然后結合高年制學生的實際條件進行實驗設計。我校高年制的學生在進行現代生物學實驗技術學習時,已經完成了基本的醫學生物學實驗,如顯微鏡的觀察、蟾蜍的解剖等基本實驗,所以,在進行現代生物學實驗技術時已經具備了一定的知識水平。高年制的學生分兩組進行這個實驗,每組為21人,結合我室的實驗條件,倒置顯微鏡只有一臺,要完成這個實驗而且效果要好必須進行以下的實驗設計:
(1)細胞的準備:培養瓶細胞的準備和24孔板細胞的準備。
(2)蓋玻片的無菌準備。
(3)細胞固定試劑的選擇。
(4)顯微互動實驗室進行固定細胞的觀察;倒置顯微鏡進行培養瓶細胞的觀察。
(5)進行實驗結果的分析、討論。
三、具體操作步驟的改進
實驗內容設計好以后,進行具體的操作步驟:
(1)將21個學生分為7組,每3人1組。
(2)以往實驗是利用培養瓶培養細胞,但是只有一臺倒置顯微鏡,所以改為24孔板內放置蓋玻片培養細胞。
(3)每組進行培養細胞前準備。首先各組進行蓋玻片的無菌處理,然后將無菌的蓋玻片放入24孔板內。
(4)各組進行24孔板內細胞接種培養,即爬片。
(5)將有細胞的蓋玻片取出,各組進行固定。
(6)第一組、第二組采用丙酮固定;第三組、第四組采用95%乙醇固定;第五組、第六組采用甲醛固定;第七組采用甲醇冰醋酸固定。
(7)在顯微互動實驗室進行細胞形態的觀察。
(8)交叉進行倒置顯微鏡下觀察培養瓶內的細胞。實驗完成后進行實驗報告的書寫,內容包括實驗原理、實驗目的、實驗設計及實驗結果的討論等。學生將固定的細胞和未固定細胞的形態觀察進行討論分析,討論的過程較熱烈,有的學生提出的問題特別有意義,這樣既可以讓每個學生參與實驗,同時,又增強了同學提出問題、解決問題的能力。
針對觀察體外培養細胞的基本形態這個實驗,我們進行了以上這幾個方面的改進,使學生在教學過程中的各個環節都主動參與并不斷地提出新的問題。在這個過程中,學生得到鍛煉的同時,教師也在教學中得到了學習,擴展了知識面。實驗教學是樹立學生實踐觀念,培養分析、解決實際問題能力,啟迪學生創新思維,提高學生綜合素質的重要環節。所以,在實驗教學過程中,我們要不斷地進行探索和改革,這樣更有利于培養學生的新能力和科研素質。
生物實驗報告9
實驗教學是高等教育教學活動的重要環節。通過實驗課不僅可以加深學生對課堂內容的理解,鞏固已學到的理論知識,而且能夠培養學生理論聯系實際的能力、分析問題和解決問題的能力,對于活躍思維、提高創新能力起著積極的作用。
食品微生物學是食品專業學生必修的專業課,是普通微生物學的延伸。食品微生物學是一門實踐性和應用性較強的學科,它要求學生在系統學習基礎理論知識的基礎上,掌握食品微生物學檢測技術、分離純化技術、鑒定技術、發酵食品的制備技術、食品加工與保鮮技術以及現代分子微生物學實驗方法等。通過食品微生物實驗教學培養出不僅具有豐富理論知識,而且能掌握現代生物技術并熟練操作的高技能人才。
如何加強食品微生物實踐教學的組織指導,如何調動學生的積極性,提高實驗教學效果一直是我們關注和探索的問題。下面簡單談一下我們在食品微生物實驗教學中遇到的問題,解決的方法和對一些問題的思考。
1、精心選擇實驗內容,調動學習積極性
隨著食品工業和微生物檢測技術的迅速發展,食品微生物學及其實驗課的內容也不斷擴展,而實驗課既受理論課內容進度的限制,又受課時及實驗室等客觀條件的限制。要在有限的課時內,系統、科學地完成食品微生物所有的實驗項目是絕對不可能的,這就要求我們實驗教師在掌握微生物學教學大綱的前提下,結合現代科技的發展和食品微生物的研究動態,精心設計實驗課教學體系,合理選擇實驗項目。
選擇實驗內容,我們由淺入深,由感性到理性。首先要求學生對食品中常見細菌、酵母菌、霉菌、乳酸菌進行觀察,掌握其性狀特征和培養生長條件。學會識別哪些是有益菌,哪些是有害菌,利用有益菌的代謝活動制造更多的發酵產品,提高食品的質量,同時防止有害菌引起食品腐敗變質以及食物中毒。其次選擇有代表性的發酵食品作為實驗內容,使學生了解利用微生物生產發酵食品的整個過程,通過這些實驗使同學們對食品發酵有一個總體印象,并能舉一反三。最后對不同的食品和發酵食品設計實驗,讓學生掌握食品微生物學檢測技術、分離純化技術、鑒定技術。并在課堂上結合自己的科研成果和食品研究熱點介紹食品工業發展的前沿動態。
實驗設計過程中,不僅有驗證性實驗,更多地引進了綜合性和設計性實驗,學生分成幾人一組,讓學生從實驗設計,自己選擇原材料,準備實驗材料,試劑的配置,培養基的制備和滅菌等都由學生自己完成,最后寫成規范的實驗報告。學生對此積極性很高,甜酒釀、酸奶、腐乳等都是同學們喜歡并制作的發酵食品。在這個過程中學生將所學內容貫通,并熟悉掌握各個環節的操作步驟,這對學生將來步入社會,在工作崗位上獨立開展工作都會有很大的幫助。
2、強化基礎技能的訓練,有效組織管理實驗教學
食品微生物學是在掌握微生物的基本實驗技能的基礎上開展的,學生無菌操作觀念的培養、正確使用、掌握微生物的實驗儀器,如光學顯微鏡、滅菌消毒器械等都非常重要。但基于很多原因,學生的這些基礎技能還是很薄弱,所以我們在進行食品微生物的每一個實驗的每一個步驟中只要涉及這些基礎性的'知識,都會給予強調,親自演示。
學生微生物基礎技能培養和形成,不是一兩堂課能完成,也不是單單有老師演示后學生就可以掌握,必須讓學生每人親自動手。但在實際教學過程中,由于學生人數的增加,硬件等條件限制,人手一套實驗器材不現實,那么在有限人力、有限資源情況下,使每一位同學都能動手操作并熟悉實驗過程,有效組織和管理實驗教學過程就尤為重要。
(1)首先任課教師和實驗技術人員充分做好預實驗,對實驗的關鍵步驟和關鍵操作點都做到心中有數,在授課過程中有重點地強調,并分析某步驟出現問題可能會出現的結果。
(2)每次實驗之前任課教師和實驗技術人員就實驗進行積極的溝通,不僅對實驗準備的物品和材料溝通,更要對實驗的組織過程協商。
(3)在實驗過程中則需要任課教師和實驗技術人員相互協作,并充分發揮學生班干部和小組長的作用。課堂理論教學課和實驗課最大的區別在于,實驗課更注重學生的動手參與,以及實驗過程出現問題發現問題的及時解決。
(4)教師要嚴于律已,教師要嚴格要求自己,實驗過程中耐心指導,熱情幫助,回答好學生提出的每個問題,并隨時糾正不正確或不規范操作。
3、加強實驗課考核,引進綜合實驗考評
實驗課的成績給定,往往包括實驗課出勤率和實驗報告成績兩方面綜合。所以首先就要求教師認真考勤,只有學生的出勤率有保證才能有效地組織教學活動。其次,要求實驗報告書寫規范,詳細完成實驗報告,對實驗結果進行討論,實驗失敗要分析原因。同時教師也對實驗報告認真批改,實驗報告是對實驗的總結,也是對實驗課質量高低的檢驗。通過對實驗報告的批改,可以發現學生的實驗操作能力和觀察分析問題的能力。
實際教學中,實驗報告雷同和抄襲的現象比較多見,為綜合考評學生實際動手能力和對實驗技能的掌握,建議今后引進期末的綜合實驗考評:即將各個試驗項目設計成不同的實驗題目,讓每個學生隨機抽取并在有限的時間內獨立完成操作,視完成的情況給予評分。比如:“食品中常見菌類的平板培養”考察了無菌操作、培養基的制備,對食品中常見菌類平板接菌技術;“食品中常見菌類的形態觀察”考察了革蘭氏染色,各真菌形態辨別等。在進行具體考核過程中,可把每個考核的內容進行量化定出詳細的評分標準,根據學生的每一個操作環節現場打分,并對同學進行現場提問,讓學生進行答辯。
4、有計劃推進實驗室的開放加強實驗室開放管理
微生物實驗室的開放是對食品微生物實驗課的有益補充,能強化、鞏固、提升對食品微生物課程內容的理解,我們鼓勵學生設計和開發自己的科研項目,而且學校有很優厚的資金加以支持。但是開放實驗室不是無條件的,有時因實驗操作不當引起的安全隱患是很嚴重和難以預料。因此實驗室開放時管理須給予加強。
建立科學的管理機制,利用校園網建設實驗網站,公布開放實驗項目的題目、時間和地點,供學生選擇和預約。
專人負責學生的科研隊伍,對菌種、標準品、和學生用到的有毒有害物質要有專人負責,注意保管,不隨意丟棄,做好無害化處理。對使用儀器學生做好使用登記,實驗物品注意清洗、歸還、交接。
總之,食品微生物實驗課,只有提高對實驗教學活動的認識,精心選擇實驗內容,合理有效組織和管理實驗過程,并加強實驗課的考核,在此基礎上,推進實驗室對學生的開放,加強開放實驗室的管理,就能確保實驗課安全、有序、成功的完成,達到教學目的,也使學生真正有所收獲。
生物實驗報告10
實驗教師:xxx
所在學校:xxx中學
目的要求:
1練習徒手切片
2認識葉片的結構
3畫葉片的表皮細胞和保衛細胞
材料用具:
新鮮葉片(如菠菜、槐樹、蠶豆的葉片),顯微鏡,雙面刀片(兩片、并在一起、一側用膠布粘牢)、鑷子、載玻片、蓋玻片、葉片的永久切片、盛有清水的培養皿、滴管、吸水紙、碘液、紗布、毛筆、小木板。
方法步驟
方法與步驟要點
注意事項
(一)練習徒手切片,制作葉片橫切片的臨時切片
1將新鮮的'葉片平放在小木板上。
2右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割。
3把刀片夾縫中存在的切下的薄片放入盛有清水培養皿中。要多切幾次(每切一次,刀片要蘸一下水)。
4用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時切片。葉片下面要墊上小塊木板,以防損壞桌面。刀片要捏緊,切割速度要快,注意安全。
為了便于觀察,載玻片的水滴中可以同時放幾片葉的橫切片,選擇切得最薄的一片用來觀察。
(二)觀察葉片的結構
1.用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片,再觀察葉片的永久橫切片。
2.觀察時注意分清時的表皮、葉肉和葉脈。
仔細觀察上、下表皮細胞的區別
(三)觀察葉片的下表皮
1.用鑷子撕下一小塊葉片的下表皮,制成臨時裝片。
2.用顯微鏡進行觀察,下表皮細胞的形態是什么樣子的,下表皮上有沒有氣孔?
撕取下表皮時,一定要薄,否則影響觀察效果。
注意觀察氣孔的結構。
(四)畫圖
在下面空白處畫出下表皮上一對保衛細胞及周圍的幾個表皮細胞,這一對保衛細胞要詳細畫,周圍的細胞只需勾出輪廓。
畫圖時,要真實、實事求是。
討論與交流
1.保衛細胞的結構特點對植物的蒸騰作用有什么意義?
2.從結構上看,葉片有哪些方面是適于接受陽光的?
生物實驗報告11
一、學生基本情況分析:
生物學對于七年級學生是新接觸的一門自然科學,多數學生的興趣較濃,學習勁頭較足,涉及到學習方法和學習習慣的逐漸養成,就這次期中考試成績來看,學生基本上考出了自己的真實水平,也有少數學生發揮欠佳。下面就本次期中考試試題作以下分析。
二、整體分析:
這次期中考試,生物試卷共30分,考試時間18分鐘。試卷由兩大題組成,分選擇題和填空題。突出考察學生基礎知識的掌握情況和實驗的能力。就試卷內容來看,題量比較適宜,難易程度體現了教材的.重點、難點,沒有偏題、怪題,覆蓋面比較廣,知識點多且靈活,更能與生活實際中的問題密切結合。對發展學生智力,提高學生能力有所幫助。本次考試平均分為16.8分。
三、卷面分析:
1.選擇題共10個,共占20分,實得分為12.4分,得分率為62%。錯誤較多的有:2小題、5小題、6小題、8小題、10小題,主要是動植物結構層次部分的內容,理解性較強,學生掌握情況不好。而生物特征本章的內容學生掌握良好,得分率達78%。
2.填空題共10分,實得分4.4分,得分率為44%。本大題分為5個小題,主要為實驗探究題,要求學生對實驗的過程,現象要清楚,能根據實驗現象得出結論。學生失分較多,主要是學生對實驗題還有一定的陌生,對實驗步驟上不夠嚴謹,是十分的一個主要原因。
四、總述。
本次考試認識到了在對七年級的生物教學中存在了一些不足和問題,在以后的輔導中要著重進行基礎知識的復習。所以在下半學期中將采取措施:
1、抓基礎,重應用。
要重視基礎知識的教學,對重要的生物知識加強理解。對需要識記的知識,要求學生掌握。加大對學生思維能力的訓練。
2、加強知識與實際的聯系與探究。
教學中要密切聯系學生的生活,注重培養學生運用知識解決問題的能力。要把知識放到實際問題情境中來學習,讓學生在問題情景中結合自身體驗來思考問題,討論交流,尋求解答途徑。
3、重視實驗教學力爭做好每一次演示實驗和分組實驗,引導學生自主探究,提高學生的動手能力和分析,觀察與歸納能力。
4、加強專題訓練和針對性訓練。
總之,通過這次考試,認真進行總結,反思教學效果。根據學情制定合理的教學計劃,理清工作思路,狠抓課堂教學,注重實效,提高教學質量。
生物實驗報告12
一、實驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。
二、實驗原理
1、還原糖的鑒定原理
生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的`顏色變化過程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。
2、蛋白質的鑒定原理
鑒定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡合物,這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此,蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。
3、脂肪的鑒定原理
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實驗過程(見書P18)
四、實驗用品(見書P18)
五、注意
1、關于鑒定還原糖的實驗,在加熱試管中的溶液時,應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時試管口不要朝向實驗者,以免試管內溶液沸騰時沖出試管,造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2、斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3、蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么?
生物實驗報告13
《普通生物學》是高等院校生物工程、生物技術專業的一門必修專業基礎課程,也是一門實驗性很強的課程。近年來,許多高校均已開設這門綜合課程。該課程以培養學生的生物學能力,提高學生的生物學素養為總目標。如何能更好地實現這一課程目標?如何提高實驗教學質量?圍繞這些問題,我在普通生物學實驗教學體系、教學內容、教學方法及實驗考核辦法等方面作了一些改革,取得了一些成果。
一、精選內容,構建合理的《普通生物學》實驗項目體系
精選實驗內容,并在實踐過程中進行完善修改,構建合理的《普通生物學實驗》項目體系。精選內容時要注意以下幾個方面。
(一)注重內容的經典性和基礎性。
在精選實驗內容過程中,進行必要的實驗項目取舍。有些經典的實驗內容經過長期教學實踐的錘煉,對學生加深基礎知識的理解、增加基本技能的鍛煉有很好的幫助,像這樣的經典實驗內容一定要保留。在保留的基礎上,還要特別注意實驗內容的創新。例如:“顯微鏡的使用”是一個很基礎、很經典的實驗,并為后續課程的實驗提供一定的基本技能,在這個實驗中可結合細胞形態觀察,動物和植物細胞結構比較、組織器官的制片和觀察等內容。
(二)注重內容的連續性和層次性。
為了改變目前實驗項目驗證性實驗過多,綜合性、設計性實驗過少的情況,在內容層次化結構中,要注意根據各自的教學目標,反映從認知層面到應用層面再到創新層面的逐步提高的過程,這樣符合學知識、用知識,發展創造能力的循序漸進的發展規律。
在認知層面上的實驗如“常見動植物基本組織結構的制片觀察”、“生物繪圖”等的基礎上進行綜合層次實驗,如“魚的`系列實驗”、“植物群落特征調查”等。在基礎和綜合實驗基礎上進行設計創新實驗。在完成必做實驗以后,布置學生進行設計實驗,可學生自選題目,也可老師提出問題讓學生自行探究,鍛煉學生思維,培養自主學習能力。
(三)注意內容的可行性和實際性。
在確定實驗內容時,不僅要根據課程的需要,而且要根據實際情況,包括要考慮學生的認識水平、實驗室的儀器設備情況,以及結合當地實驗材料采集、培養的難易程度等方面的因素選擇可操作性強的實驗內容。如“水螅、渦蟲、蛔蟲”等實驗材料,如今越來越難找到,但又有其典型性,于是,將其列為選做實驗,或者換作其他易于獲得的實驗材料進行相關實驗。
二、修訂大綱,構建合理的《普通生物學》實驗教學體系
修訂實驗教學大綱是實驗教學工作的重要組成部分,提高教學質量的主要教學環節之一,對提高學生實際操作水平,加強學生創新能力和實踐能力的培養起著重要作用。依據我院生物工程和生物技術專業教學計劃和《普通生物學》課程的要求,本實驗課程共有20個課時,在編制本課程實驗教學大綱的過程中,應明確實驗類型(必修、選修)、實驗屬性(演示性、驗證性、綜合性、設計性),培養學生進行科學實驗的基本方法與技能,激發學生的創新思想能力,提高創新能力。
生物工程專業在課程設置上側重于細胞、生化、微生物、遺傳等工廠化操作領域。生物技術專業則側重于在動植物個體生物學方面內容,因此,在編寫實驗教學大綱時,針對不同專業,進行內容取舍。生物工程專業著重于培養學生在動物學、植物學結構和功能方面的實驗基本技能,生物技術專業著重于培養學生在動物學、植物學發展和應用方面的實驗基本技能。
三、規范教學,構建多元化的《普通生物學》實驗教學指導體系
為了規范實驗教學,提高實驗教學質量,編寫實驗教學指導書。并從操作、實驗報告的撰寫等各個方面,給學生以指導,努力構建多元化的實驗教學指導體系。
(一)完善課程體系,編寫適用的實驗指導書。
隨著普通生物學實驗教學改革的不斷深入,實驗教材的編寫也在發展中。目前,仍然很難找到一本適合我院實際的普通生物學實驗指導書,這給教學帶來了一定的難度和不便。因此,根據本課程改革的需要和我國高校生物科學實驗的教學改革思路,在近幾年教學實踐的基礎上,努力編寫普通生物學實驗指導書,希望能力求做到完整、系統、實用、可操作,滿足普通生物學實驗的教學需要。目前只有部分手稿,在學生實驗過程中起到了較好的指導作用。
(二)加強實驗報告撰寫的指導。
撰寫實驗報告是實驗教學的一個重要環節,是衡量學生分析問題、解決問題能力的一個重要依據,因此,要重視學生實驗報告的撰寫質量,在認真批改實驗報告后,對學生進行集體指導和個別指導,對不符合要求及不認真撰寫的實驗報告,堅決要求返工改正。通過實驗報告的撰寫讓學生展開多維度的思考。
四、注重以人為本,改革《普通生物學》實驗教學方法
在該課程教學過程中,應該牢固樹立以學生為主體的以人為本意識,改革教學方法,不斷提高實驗教學質量。
(一)培養學生嚴謹的科學態度和作風。
從實驗的準備到完成,指導學生直接參與實驗的準備和整理工作,在學生預習實驗的基礎上,鼓勵學生參與實驗所用物品的準備工作。這樣可以促使學生對實驗全部過程有系統的認識,獨立地完成實驗,培養創新意識,提高實踐技能、使學生在嚴格、系統的訓練中,提高動手能力,為將來就業或繼續深造創造條件。
(二)改進教學方法,調動學生主觀能動性。
實驗課常規由教師演示,實驗目的、實驗原理、材料用具、操作步驟及結論等按要求進行,在教學實踐中,我發現有的學生只重視最后的實驗數據和實驗結果,而忽視實驗過程中儀器的正確使用。針對這種情況,實驗指導教師每次上課,都要自始至終認真指導學生的操作技能訓練,加強在課堂中的現場指導,保證學生實驗操作的規范性。對于綜合性實驗,除了課內知識外,還要積極鼓勵學生自己設計一些感興趣的課外實驗來培養學生觀察、分析、動手解決問題的能力;通過植物園、動物園、生態學野外實習所獲得的實踐知識,會對學生將來從事科學研究產生積極的作用,因此,在實習中融入實訓的內容是提高實驗教學質量的一個重要途徑。
五、規范實驗考核模式,建立完善的《普通生物學》實驗評價體系
在以往的教學中,學生的實驗成績主要以實驗報告成績來評定,這樣做不能全面考核學生的實驗能力和水平。在《普通生物學》實驗教學改革中,采取考勤、實驗態度、實驗預習、實驗操作、實驗報告等多項考核定成績的方法,并堅持實驗操作考核。具體考核內容包括三個部分:平時的實驗態度與實驗操作占30%;實驗報告的書寫與實驗結果的分析討論占30%;隨機抽取題目并獨立完成的實驗考試占40%。三種方式綜合評定實驗成績,避免了教師只看平時表現打分的過分主觀性,以及不同教師不同的評定標準;更正了學生只注重操作,忽視對實驗結果分析和總結的錯誤觀念;真正有利于學生實際操作能力的培養。
總之,普通生物學實驗課教學改革涉及面廣,環節多,比較復雜。我們只是在這方面做了一些有益的嘗試,并取得了一定的成功經驗。通過實驗教學改革,學生的實驗能力得到了充分的訓練和提高,主觀能動性和創造性得到了培養,真正實現了在實驗教學中培養學生分析問題與解決問題的能力、獨立自主的工作能力、合作與交流的能力、改革與創新的能力。
生物實驗報告14
質粒DNA的提取、純化及檢測
姓名:XXX學號:2011001400XX年級:20xx級生物基地班 實驗日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒DNA的原理和方法。
2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。
3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實驗原理】
1、質粒DNA的制備方法
質粒(Plasmid)是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環狀雙鏈DNA分子,分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中,但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1~200Kb之間,是應用最多的質粒類群,在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的DNA。
質粒DNA的制備包括3個步驟:①培養細菌,使質粒DNA大量擴增;②收集和裂解細菌;③分離和純化質粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒DNA。
2、質粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中,染色體DNA和質粒DNA均被釋放出來,但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性;共價閉合環狀質粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調節堿性溶液至中性時,變性的質粒DNA可恢復原來的共價閉合環狀超螺旋結構而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復性,而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心,與復性的溶于溶液的質粒DNA分離。溶于上清液的質粒DNA,可用無水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質類似,乙醇沉淀
DNA的同時,也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質粒DNA。
3、凝膠電泳進行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質,它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中,其中的電離子會發生移動,移動的速度可因電離子的大小形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異,就可以區別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學的核心技術之一。
凝膠電泳技術操作簡單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發下也能直接檢測到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實驗。
分子生物學中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高,長度上相差1bp或質量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測定DNA的相對分子質量,分離經限制酶水解的DNA的片段,進一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負電荷,在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、【實驗材料】
1、實驗儀器
培養皿、接種環、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。
2、實驗試劑
LB培養基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預冷無水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對分子質量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實驗步驟】
1、準備實驗
配制LB液體培養基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養基;準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個 ,將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。
2、菌體培養
在含有Ap的LB平板上挑取一環攜帶有質粒pUC19的.E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養基中進行37℃振蕩過夜培養,培養基中加Ap100ul
(100ug/ml),質粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質粒得以生長。 過夜培養后菌體量大,雜質較多,然后用移液槍吸取過夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中,培養基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養4—6h至對數生長期后期,生長速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質少,適合提取質粒。
3、質粒提取
(1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒滿,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細胞。
(2)向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質量為106mg。
(3)洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細胞提前破裂,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當的pH。
(4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對應),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發生了從bilayer(雙層膜)結構向micelle(微囊)結構的相變化導致細胞溶解。同時,強堿性使染色體DNA、質粒DNA和蛋白質變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
(5)按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ對應),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質粒DNA復性。反應形成的高鹽環境進一步加速了沉淀。
(6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側,用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
(7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
(8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色,隨著水分的減少質粒變為無色。所以為了完全溶解質粒,要在離心管上標記質粒所在位置。
(9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩定的生理狀態,呈弱堿性,有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質粒純化
(1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
(2)將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無色,在中間產生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質。
(3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑,但是苯酚留在質粒溶液中會影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現的泡沫,有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質的存在。
(4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
(5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
(6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
(7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
(8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質粒檢測
(1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
(2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
(3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍色)的移動。
(4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進EB溶液中進行染色,完全浸泡約5min。
(5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項】
(1)滴加溶液II時,要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動作要快,因為強堿在溶液中停留時間不能過長,否則會破壞質粒DNA。
(2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強堿使質粒復性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實驗報告15
一、實驗名稱:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞
二、實驗材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片,及其他細胞裝片。
三、實驗步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實驗臺上。
2、對光:轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。
3、調節載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見亮的光圈。
4、觀察:調節粗準焦螺旋,把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內看,同時轉動粗準焦螺旋等,直到看清切片上的.細胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項:
1、取送顯微鏡時,應右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時,坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。
3、切忌一面從目鏡進行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調節焦距時,切勿使用粗調節器,以免壓壞標本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開鏡頭后再取出玻片標本,以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。
五、實驗原理:
利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
六、創新點:
在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片,以供學生操作、觀察,增加了學生動手實驗的時間,使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程,從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。
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