生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告15篇[集合]
隨著個(gè)人的文明素養(yǎng)不斷提升,越來越多人會(huì)去使用報(bào)告,我們?cè)趯憟?bào)告的時(shí)候要避免篇幅過長(zhǎng)。其實(shí)寫報(bào)告并沒有想象中那么難,以下是小編為大家收集的生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望對(duì)大家有所幫助。
![生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告15篇[集合]](/pic/00/c9faceef07_5fbf7f3b53ba8.jpg)
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告1
為了加強(qiáng)我院醫(yī)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理工作,確保實(shí)現(xiàn)醫(yī)院的安全目標(biāo),我院檢驗(yàn)科根據(jù)xxxx省《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)規(guī)定,對(duì)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室的安全管理工作進(jìn)行了自查。我們還針對(duì)涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進(jìn)行了培訓(xùn),提高他們的生物安全意識(shí),并確保他們掌握必要的生物安全知識(shí)。
一、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作、各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況
醫(yī)院檢驗(yàn)科注重學(xué)習(xí)和遵守《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》,并定期對(duì)生物安全各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查和整改。實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格遵守國家標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程,并指派專人監(jiān)督檢查其落實(shí)情況。同時(shí),詳細(xì)記錄檢查情況,并定期召開會(huì)議討論發(fā)現(xiàn)的問題,并及時(shí)糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運(yùn)輸
由于目前我院的相關(guān)條件存在限制,暫時(shí)無法開展病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物的檢查。為了滿足通知要求,我們積極組織相關(guān)人員學(xué)習(xí)了以下內(nèi)容:嚴(yán)格管理病原微生物實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種的登記制度,一旦收到菌(毒)種后立即進(jìn)行編號(hào)登記,并詳細(xì)記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號(hào)、傳代日期和數(shù)量。在菌(毒)種的管理過程中,包括安全保衛(wèi)制度、安全保衛(wèi)措施和保管過程中的傳代、分發(fā)和使用,都需要及時(shí)進(jìn)行登記,同時(shí)定期核對(duì)庫存數(shù)量。在銷毀菌(毒)種時(shí),還需進(jìn)行滅菌指示標(biāo)志和滅菌效果的登記,并做好銷毀過程的記錄。
三、實(shí)驗(yàn)室生物安全突發(fā)事件的處理工作
在本次自我檢查中,我們實(shí)驗(yàn)室對(duì)之前制定的應(yīng)急指揮和處置體系進(jìn)行了修訂,以更好地滿足實(shí)際工作的需求。
當(dāng)遭遇自然災(zāi)害(例如地震、水災(zāi)等)或設(shè)施故障時(shí),我們制定了針對(duì)可能出現(xiàn)的緊急情況的處理原則和應(yīng)對(duì)措施。
同時(shí)規(guī)范了菌(毒)種外溢在臺(tái)面、地面和其他表面的'的處理原則、皮膚刺傷(破損)的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報(bào)告制度。
我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室的醒目位置貼出了一份聯(lián)系電話列表,方便大家隨時(shí)獲取相關(guān)部門的聯(lián)系方式。這份列表包括實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人、實(shí)驗(yàn)室工作人員、消防部門、醫(yī)院、公安機(jī)關(guān)、工程技術(shù)人員、以及水、電氣維修部門的電話號(hào)碼。
四、提高意識(shí),加強(qiáng)學(xué)習(xí)
組織檢驗(yàn)人員對(duì)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí),同時(shí)加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)入制度的管理,標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室類型、負(fù)責(zé)人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強(qiáng)了個(gè)人安全防護(hù)。
經(jīng)過此次對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作的自查,我們?nèi)w檢驗(yàn)人員對(duì)該工作的重要性有了更深刻的認(rèn)識(shí)。為加強(qiáng)管理,確保實(shí)驗(yàn)室工作的安全,我們采取了有效措施。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告2
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步學(xué)會(huì)探索酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學(xué)反應(yīng)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們?cè)诿傅拇呋饔孟露寄芩獬蛇原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成磚紅色的'氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應(yīng)。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計(jì)、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實(shí)驗(yàn)過程
(見書P47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
2.兩支試管保溫時(shí),為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?
3.如果2號(hào)試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告3
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1、還原糖的鑒定原理
生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中,用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過程為:淺藍(lán)色棕色磚紅色(沉淀)。
2、蛋白質(zhì)的鑒定原理
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL(B)的`硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。
3、脂肪的鑒定原理
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實(shí)驗(yàn)過程(見書P18)
四、實(shí)驗(yàn)用品(見書P18)
五、注意
1、關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn),在加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2、斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3、蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告4
醫(yī)學(xué)生物學(xué)是中醫(yī)院校的基礎(chǔ)課程,是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是醫(yī)學(xué)生物學(xué)教學(xué)過程中重要的組成部分,實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果的好壞直接影響課堂教學(xué)的效果和學(xué)生對(duì)醫(yī)學(xué)生物學(xué)的興趣。高年制的醫(yī)學(xué)生是各醫(yī)學(xué)院校重點(diǎn)培養(yǎng)的高層次醫(yī)學(xué)人才,因此,對(duì)他們的要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于五年制學(xué)生,除了要求他們掌握全面扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)外,還要求他們具有較高的科研素質(zhì)、創(chuàng)新能力和實(shí)踐能力,進(jìn)而全面提高高年制學(xué)生的綜合素質(zhì),培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題的能力。基于此,實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革成為我們教學(xué)的重點(diǎn)。筆者綜合分析目前我室的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程,除了基本的醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)外,還開設(shè)了現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)課,這門實(shí)驗(yàn)課主要包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞傳代和染色體顯帶等實(shí)驗(yàn);在進(jìn)行觀察體外培養(yǎng)細(xì)胞的基本形態(tài)這個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí),對(duì)該實(shí)驗(yàn)進(jìn)行幾個(gè)方面的改革,主要包括對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)具體操作進(jìn)行改進(jìn),經(jīng)調(diào)查,改革后實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果較好。
一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法改革
觀察體外培養(yǎng)細(xì)胞的基本形態(tài)這個(gè)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的有兩個(gè):
一是掌握倒置顯微鏡的使用方法;
二是讓學(xué)生了解細(xì)胞的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)和體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況。
這樣,有助于學(xué)生理解細(xì)胞是生命有機(jī)體的基本結(jié)構(gòu)單位。針對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模覀儾捎枚嗝襟w教學(xué)和國內(nèi)外文獻(xiàn)教學(xué)相結(jié)合,從體外培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)特征類型開始講解,結(jié)合不同細(xì)胞的圖片,逐步講解。同時(shí),結(jié)合實(shí)物演示(培養(yǎng)瓶中裝有不同時(shí)間的培養(yǎng)細(xì)胞)給學(xué)生講解體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況和細(xì)胞培養(yǎng)中的污染情況,使學(xué)生對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)先有感官認(rèn)識(shí),然后讓學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。
二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)
在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)過程中,我們首先對(duì)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件和經(jīng)費(fèi)進(jìn)行考慮,然后結(jié)合高年制學(xué)生的實(shí)際條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。我校高年制的學(xué)生在進(jìn)行現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)學(xué)習(xí)時(shí),已經(jīng)完成了基本的醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如顯微鏡的觀察、蟾蜍的解剖等基本實(shí)驗(yàn),所以,在進(jìn)行現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)時(shí)已經(jīng)具備了一定的知識(shí)水平。高年制的學(xué)生分兩組進(jìn)行這個(gè)實(shí)驗(yàn),每組為21人,結(jié)合我室的實(shí)驗(yàn)條件,倒置顯微鏡只有一臺(tái),要完成這個(gè)實(shí)驗(yàn)而且效果要好必須進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):
(1)細(xì)胞的準(zhǔn)備:培養(yǎng)瓶細(xì)胞的準(zhǔn)備和24孔板細(xì)胞的準(zhǔn)備。
(2)蓋玻片的無菌準(zhǔn)備。
(3)細(xì)胞固定試劑的選擇。
(4)顯微互動(dòng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行固定細(xì)胞的觀察;倒置顯微鏡進(jìn)行培養(yǎng)瓶細(xì)胞的觀察。
(5)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析、討論。
三、具體操作步驟的改進(jìn)
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)好以后,進(jìn)行具體的操作步驟:
(1)將21個(gè)學(xué)生分為7組,每3人1組。
(2)以往實(shí)驗(yàn)是利用培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,但是只有一臺(tái)倒置顯微鏡,所以改為24孔板內(nèi)放置蓋玻片培養(yǎng)細(xì)胞。
(3)每組進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞前準(zhǔn)備。首先各組進(jìn)行蓋玻片的無菌處理,然后將無菌的`蓋玻片放入24孔板內(nèi)。
(4)各組進(jìn)行24孔板內(nèi)細(xì)胞接種培養(yǎng),即爬片。
(5)將有細(xì)胞的蓋玻片取出,各組進(jìn)行固定。
(6)第一組、第二組采用丙酮固定;第三組、第四組采用95%乙醇固定;第五組、第六組采用甲醛固定;第七組采用甲醇冰醋酸固定。
(7)在顯微互動(dòng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)的觀察。
(8)交叉進(jìn)行倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)完成后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫,內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論等。學(xué)生將固定的細(xì)胞和未固定細(xì)胞的形態(tài)觀察進(jìn)行討論分析,討論的過程較熱烈,有的學(xué)生提出的問題特別有意義,這樣既可以讓每個(gè)學(xué)生參與實(shí)驗(yàn),同時(shí),又增強(qiáng)了同學(xué)提出問題、解決問題的能力。
針對(duì)觀察體外培養(yǎng)細(xì)胞的基本形態(tài)這個(gè)實(shí)驗(yàn),我們進(jìn)行了以上這幾個(gè)方面的改進(jìn),使學(xué)生在教學(xué)過程中的各個(gè)環(huán)節(jié)都主動(dòng)參與并不斷地提出新的問題。在這個(gè)過程中,學(xué)生得到鍛煉的同時(shí),教師也在教學(xué)中得到了學(xué)習(xí),擴(kuò)展了知識(shí)面。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是樹立學(xué)生實(shí)踐觀念,培養(yǎng)分析、解決實(shí)際問題能力,啟迪學(xué)生創(chuàng)新思維,提高學(xué)生綜合素質(zhì)的重要環(huán)節(jié)。所以,在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中,我們要不斷地進(jìn)行探索和改革,這樣更有利于培養(yǎng)學(xué)生的新能力和科研素質(zhì)。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步學(xué)會(huì)探索酶的催化效率的方法。
2.探索過氧化氫酶和Fe3+催化效率的高低。
二、實(shí)驗(yàn)原理
新鮮的'豬肝中含有過氧化氫酶,F(xiàn)e3+是一種無機(jī)催化劑,它們都可以催化過氧化氫分解
成水和氧
三、材料用具
質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的新鮮豬肝漿、滴管、試管、火柴、試管架、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的氯化鐵溶液、體積分?jǐn)?shù)為3%的過氧化氫溶液。
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P30)
五、討論
實(shí)驗(yàn)中選擇新鮮的豬肝是因?yàn)樾迈r的豬肝中的酶活性較高,能夠更有效地催化反應(yīng)。另外,新鮮的豬肝也能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。在滴入豬肝研磨液和氯化鐵溶液時(shí),不可以公用一個(gè)吸管。這是因?yàn)閮煞N液體中可能含有不同的物質(zhì),通過公用一個(gè)吸管會(huì)導(dǎo)致交叉污染,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告6
年級(jí)班實(shí)驗(yàn)人:組次:試驗(yàn)時(shí)間:
一、探究目的
1、通過觀察酒精或煙草浸出液對(duì)水蚤心率的影響,知道酗酒和吸煙對(duì)人體健康的.危害。
2、知道生活方式和飲食習(xí)慣對(duì)人類健康的影響。
二、探究步驟
1、發(fā)現(xiàn)并提出問題:______________________________________ 。
2、作出假設(shè):___________________________________________________ 。
3、制定計(jì)劃:
4、實(shí)施計(jì)劃:認(rèn)真記錄和分析探究的過程和結(jié)果和。
5、得出結(jié)論:_________________________________________________________ 。
6、表達(dá)交流。
三、討論
1、酒精或煙草浸出液對(duì)水蚤心率有什么影響?怎樣解釋這種現(xiàn)象?
2、酗酒和吸煙對(duì)人體健康可能有哪些危害?
3、影響人們健康的因素有哪些?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告7
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、學(xué)會(huì)提取和分離葉綠體中色素的方法。
2、比較、觀察葉綠體中四種色素:理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系
二、實(shí)驗(yàn)原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上,而葉綠體中的色素能溶于有機(jī)溶劑中。故要提取色素,要破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),破壞葉綠體膜,使基粒片層結(jié)構(gòu)直接與有機(jī)溶劑接觸,使色素溶解在有機(jī)溶劑中。葉綠體中的色素有四種,不同色素在層析液(脂溶性強(qiáng)的有機(jī)溶劑)中的'溶解度不同,因而隨層析液的擴(kuò)散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養(yǎng)皿、毛細(xì)吸管、量筒、有機(jī)溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P54)
1、提取色素:xxxx。
2、制備濾紙條:xxxx。
3、色素分離,紙層析法。(不要讓濾液細(xì)線觸及層析液)
4、觀察:層析后,取出濾紙,在通風(fēng)處吹干。觀察濾紙條上出現(xiàn)色素帶的數(shù)目、顏色、位置和寬窄。結(jié)果是:4條色素帶從上而下依次是:胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍(lán)綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1、濾紙條上的濾液細(xì)線為什么不能接觸到層析液?
2、提取和分離葉綠體中色素的關(guān)鍵是什么?
六、結(jié)論
略
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告8
實(shí)驗(yàn)名稱:
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細(xì)胞中的`細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P30)
1.制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4.用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
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五、討論
1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對(duì)于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4.用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告9
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的'濃度低于外界溶液的濃度時(shí),水分會(huì)通過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,導(dǎo)致細(xì)胞壁和原生質(zhì)層發(fā)生收縮。因?yàn)樵|(zhì)層的收縮性大于細(xì)胞壁,隨著細(xì)胞不斷失水,原生質(zhì)層逐漸與細(xì)胞壁分離,即發(fā)生了質(zhì)壁分離。相反,當(dāng)細(xì)胞液的濃度高于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分會(huì)通過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中,原生質(zhì)層會(huì)逐漸恢復(fù)到原來的狀態(tài),從而使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P60)
五、討論
1. 如果把洋蔥表皮細(xì)胞浸泡在與細(xì)胞液等滲的蔗糖溶液中,這些細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。
2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.繪制一組模式圖,描述一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下,經(jīng)過處理后的變化。首先將細(xì)胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理,然后再經(jīng)過清水處理。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告10
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測(cè)
姓名:XXX學(xué)號(hào):2011001400XX年級(jí):20xx級(jí)生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。
3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗(yàn)原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒(Plasmid)是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細(xì)菌、放線菌、真菌以及一些動(dòng)植物細(xì)胞中,但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群,在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟:①培養(yǎng)細(xì)菌,使質(zhì)粒DNA大量擴(kuò)增;②收集和裂解細(xì)菌;③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細(xì)菌細(xì)胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來,但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達(dá)12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性;共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊(cè)谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA可恢復(fù)原來的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復(fù)性,而是與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心,與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類似,乙醇沉淀
DNA的同時(shí),也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異,就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測(cè)到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實(shí)驗(yàn)。
分子生物學(xué)中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長(zhǎng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(zhǎng)鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對(duì)分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的'電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測(cè)定DNA的相對(duì)分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗(yàn)材料】
1、實(shí)驗(yàn)儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號(hào)槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號(hào)筆、手套等。
2、實(shí)驗(yàn)試劑
LB培養(yǎng)基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預(yù)冷無水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)
配制LB液體培養(yǎng)基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養(yǎng)基;準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個(gè) ,將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過夜培養(yǎng),培養(yǎng)基中加Ap100ul
(100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(zhǎng)。 過夜培養(yǎng)后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mlLB液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期,生長(zhǎng)速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
(1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒?jié)M,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細(xì)胞。
(2)向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質(zhì)量為106mg。
(3)洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會(huì)快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細(xì)胞提前破裂,防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長(zhǎng)。Tris—Cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒H。
(4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對(duì)應(yīng)),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結(jié)構(gòu)向micelle(微囊)結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時(shí),強(qiáng)堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
(5)按比例加入冰預(yù)冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ?qū)?yīng)),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的堿性條件會(huì)打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
(6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側(cè),用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng),對(duì)DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當(dāng)加入乙醇時(shí),乙醇會(huì)奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負(fù)電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
(7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
(8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。
(9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩(wěn)定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護(hù)堿基對(duì)。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
(1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
(2)將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。
(3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì)影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會(huì)損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫,有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。
(4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
(5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
(6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
(7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。
(8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測(cè)
(1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標(biāo)好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補(bǔ)充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
(2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
(3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍(lán)色)的移動(dòng)。
(4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色,完全浸泡約5min。
(5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項(xiàng)】
(1)滴加溶液II時(shí),要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動(dòng)作要快,因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時(shí)間不能過長(zhǎng),否則會(huì)破壞質(zhì)粒DNA。
(2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應(yīng)該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告11
骨髓檢驗(yàn)報(bào)告的書寫是檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生《血液學(xué)檢驗(yàn)》課程中非常重要的內(nèi)容之一,在常見貧血、白血病等血液病的診斷、協(xié)助診斷和療效觀察過程中,臨床醫(yī)師需要反復(fù)抽取患者的骨髓送血液科進(jìn)行骨髓檢查,每次檢查后檢驗(yàn)醫(yī)師都要填寫骨髓檢驗(yàn)報(bào)告,供臨床醫(yī)師診斷疾病,觀察療效,直到患者病情完全緩解出院為止。因此,骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單的填寫質(zhì)量要求非常高,一份良好的骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單是骨髓細(xì)胞特征的全部再現(xiàn),是檢驗(yàn)醫(yī)師骨髓檢驗(yàn)技術(shù)和對(duì)臨床資料綜合分析能力的高度體現(xiàn),檢驗(yàn)醫(yī)師不僅需要較強(qiáng)的識(shí)別骨髓細(xì)胞形態(tài)的能力,寫一份合格的骨髓檢驗(yàn)報(bào)告更重要。學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中,對(duì)骨髓檢驗(yàn)報(bào)告的書寫常感到非常困難,為了上好這一課,筆者在多年的教學(xué)過程中,積極探索,結(jié)合學(xué)生實(shí)際與臨床實(shí)際,對(duì)骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單的書寫探索出了一套較好的教學(xué)方法,能使學(xué)生在較短的教學(xué)時(shí)間里寫好一份骨髓檢驗(yàn)報(bào)告,并讓學(xué)生通過骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單的書寫,全面熟悉、掌握貧血及白血病等常見血液病的血象及骨髓象特征,學(xué)會(huì)分析骨髓象,掌握相關(guān)骨髓檢驗(yàn)技術(shù),并正確為常見血液病下診斷。現(xiàn)將教學(xué)方法交流如下。
1.總結(jié)出一套骨髓檢驗(yàn)報(bào)告基本書寫模板,要求學(xué)生根據(jù)所檢驗(yàn)的血液病的血象和骨髓象特征,按照模板認(rèn)真填寫
根據(jù)教材及臨床實(shí)際,骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單的書寫具有一定規(guī)律,但對(duì)初學(xué)者學(xué)生來說,要寫好一份骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單確是一件非常困難的事,為了讓學(xué)生在課時(shí)數(shù)少的情況下盡快掌握書寫技巧,筆者為學(xué)生總結(jié)出了一套骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單書寫基本模板,供學(xué)生參考,要求學(xué)生按照模板要求認(rèn)真分析骨髓象,填寫不缺項(xiàng)。這樣做可以幫助學(xué)生理清思路,有計(jì)劃、有條理地去分析骨髓象,書寫報(bào)告單,減少了學(xué)生走彎路的時(shí)間。
1.1一般情況下骨髓象書寫基本格式
①取材滿意、涂片染色良好。
②骨髓有核細(xì)胞增生程度,粒紅比值。
③粒系細(xì)胞增生程度,所占比值,以哪1-2階段的細(xì)胞為主,各階段細(xì)胞形態(tài)特征。
④紅系細(xì)胞增生程度,所占比值,以哪1-2階段的細(xì)胞為主,各階段細(xì)胞形態(tài)特征。成熟紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)。
⑤淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比值、形態(tài)特征。
⑥全片見到巨核細(xì)胞多少個(gè),以哪1-2階段細(xì)胞為主,各階段細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)。血小板分布及形態(tài)特點(diǎn)。
⑦全片未見寄生蟲及其他異常細(xì)胞。
1.2常見貧血的骨髓象書寫格式
在報(bào)告基本格式的基礎(chǔ)上,把“4、與3、”對(duì)換位置,并要求學(xué)生要特別重點(diǎn)描述幼紅細(xì)胞形態(tài)改變,以及成熟紅細(xì)胞形態(tài)改變特點(diǎn),因?yàn)椴煌呢氀准t細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞形態(tài)都會(huì)出現(xiàn)不同的形態(tài)改變,這樣有助于貧血的分類和診斷。
1.3常見白血病的骨髓象書寫格式
在報(bào)告基本格式的基礎(chǔ)上,根據(jù)白血病發(fā)生在哪個(gè)系,就將哪個(gè)系的白血病細(xì)胞改變情況放在第3條描寫,第2條不用填寫粒紅比值,未發(fā)生白血病改變的其他系細(xì)胞受抑制。
例如,急性淋巴細(xì)胞白血病L1書寫格式:
①取材滿意、涂片染色良好。
②骨髓有核細(xì)胞增生極度活躍。
③淋巴系細(xì)胞增生極度活躍,以原始淋巴細(xì)胞為主,占65%,幼稚淋巴細(xì)胞占29%,原始淋巴細(xì)胞和幼稚淋巴細(xì)胞以小細(xì)胞為主,大小較一致,核型規(guī)則,細(xì)胞核染色質(zhì)較粗,核仁1-2個(gè),不太清楚,胞漿量少,退化細(xì)胞較多。
④紅系及粒系細(xì)胞受抑制,細(xì)胞形態(tài)基本正常。
⑤全片見巨核細(xì)胞2個(gè),血小板少見,形態(tài)基本正常。
⑥全片未見寄生蟲及其他異常細(xì)胞。
2.認(rèn)真批改學(xué)生寫的骨髓檢驗(yàn)報(bào)告,找出問題,并及時(shí)在課堂上講評(píng),指導(dǎo)學(xué)生及時(shí)糾正錯(cuò)誤
一般情況下,就算是照著模板寫報(bào)告,學(xué)生前幾次所寫的報(bào)告都會(huì)出現(xiàn)不少問題。如,常有一些學(xué)生在報(bào)告中沒有描述成熟紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn),血小板分布和形態(tài),出現(xiàn)粒紅比值計(jì)算結(jié)果錯(cuò)誤,忽略第一條“取材滿意、涂片染色良好”及最后一條“全片未見寄生蟲及其他異常細(xì)胞”等。也會(huì)出現(xiàn)不知怎樣描述異常幼紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)和白血病細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn),難下診斷等問題。還會(huì)在報(bào)告文字描述中用一些口水話,寫錯(cuò)字、涂改字等。因此,每次學(xué)生交來的骨髓檢驗(yàn)報(bào)告,筆者都會(huì)認(rèn)真批改,在報(bào)告上注明錯(cuò)誤的地方,并把正確的答案也批在報(bào)告上。然后統(tǒng)計(jì)分析學(xué)生出現(xiàn)哪些問題,某種問題出現(xiàn)人數(shù)有多少等情況。在下一次的課堂上,筆者就會(huì)針對(duì)學(xué)生出現(xiàn)的問題一一講評(píng),對(duì)學(xué)生每一次的進(jìn)步都給予表揚(yáng)。而且,每一次講評(píng)都做到講深講透。
2.1骨髓檢驗(yàn)報(bào)告中學(xué)生問題分析:
2.1.1不填取材滿意、涂片染色良好
這一條有的學(xué)生會(huì)不寫,他們認(rèn)為沒必要,但筆者要求一定要寫。因?yàn)檫@一條包含的意義在于檢驗(yàn)醫(yī)師應(yīng)該首先檢查臨床醫(yī)師送檢的骨髓片是否是成功抽取的骨髓涂片,如果取材滿意,才有對(duì)骨髓象進(jìn)行分析的價(jià)值。隨后檢驗(yàn)醫(yī)師對(duì)骨髓涂片要進(jìn)行瑞特染色,染色良好的.片子,骨髓細(xì)胞形態(tài)才好識(shí)別,才能有效分類骨髓細(xì)胞。因此,這一條的書寫,可提醒學(xué)生要重視以上問題,對(duì)初學(xué)者來說是必須的。
2.1.2粒紅比值算錯(cuò)
粒紅比值是指檢驗(yàn)醫(yī)師所分類的骨髓細(xì)胞中全部粒系細(xì)胞數(shù)除以全部紅系細(xì)胞數(shù)所得的值,這個(gè)值可以反映骨髓中粒系細(xì)胞和紅系細(xì)胞所占比例是否在正常范圍,表達(dá)方式以正常骨髓粒紅比值為例,粒:紅=2-4:1,有的同學(xué)會(huì)寫成粒紅比值1:2-4,這樣一來,意義就完全不同了,一般是學(xué)生粗心大意和理解錯(cuò)誤的結(jié)果,必須給予糾正,并說明道理。
2.1.3漏填成熟紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)
成熟紅細(xì)胞形態(tài)變化,在常見貧血的診斷中具有較大意義,不同的貧血,成熟紅細(xì)胞形態(tài)會(huì)發(fā)生不同的改變。如巨幼細(xì)胞性貧血,骨髓象中成熟紅細(xì)胞大小不均,以大細(xì)胞為主,紅細(xì)胞中央淡染區(qū)不明顯。因此,要求學(xué)生一定要重視成熟紅細(xì)胞形態(tài)描述。
2.1.4漏填血小板分布及形態(tài)特點(diǎn)
血小板數(shù)量的減少、形態(tài)的異常,會(huì)影響機(jī)體止血和凝血的功能,導(dǎo)致機(jī)體組織、器官、粘膜容易出血,或出血不止。如再生障礙性貧血和常見白血病等患者的骨髓中一般會(huì)出現(xiàn)不同程度的血小板減少,或形態(tài)異常,檢驗(yàn)醫(yī)師對(duì)骨髓中血小板分布情況和形態(tài)改變的描述,可為臨床醫(yī)師提供患者出血原因,出血程度分析等參考依據(jù),因此也很重要,要求學(xué)生不能省略或遺漏。
2.1.5忽略全片未見寄生蟲及其他異常細(xì)胞
有些寄生蟲病如瘧疾、弓形蟲病等,在骨髓中可發(fā)現(xiàn)相應(yīng)的蟲體或寄生蟲滋養(yǎng)體等,如果是血液病合并寄生蟲感染患者,發(fā)現(xiàn)寄生蟲就可為臨床醫(yī)師提供有價(jià)值的診斷依據(jù)。
有些血液病可在骨髓中發(fā)現(xiàn)特殊異常細(xì)胞及病理細(xì)胞,如骨髓癌轉(zhuǎn)移、戈謝病、尼曼匹克病等,如在骨髓中發(fā)現(xiàn)異常的癌細(xì)胞、特殊形態(tài)的戈謝細(xì)胞及尼曼匹克細(xì)胞,對(duì)相應(yīng)的疾病有絕對(duì)的診斷意義。因此,寫這一條,更重要的是提醒大家在觀察分析骨髓象時(shí)要同時(shí)注意觀察骨髓中是否存在寄生蟲,是否存在特殊異常細(xì)胞,不管有沒有,都要給臨床醫(yī)師一個(gè)明確的回答。
2.1.6異常幼紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)和白血病細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)描述不清
出現(xiàn)這個(gè)問題主要有兩個(gè)方面的原因:一是學(xué)生識(shí)別細(xì)胞能力不足,二是沒有掌握相關(guān)血液病的骨髓象特征,看不出特點(diǎn),抓不住重點(diǎn),不知該怎樣描述。針對(duì)這個(gè)問題,筆者便結(jié)合相應(yīng)血液病骨髓象進(jìn)行認(rèn)真分析,如典型的缺鐵性貧血骨髓象幼紅細(xì)胞改變特點(diǎn)為,幼紅細(xì)胞胞體小,胞漿量少,胞漿邊緣不整齊、嗜堿性,中晚幼紅細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮、深染。同時(shí)加強(qiáng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變投影演示、版圖描繪、顯微鏡下指導(dǎo),提高學(xué)生識(shí)別骨髓細(xì)胞能力及對(duì)血液病骨髓象特征掌握程度。
2.1.7正確下診斷困難
每一份骨髓檢驗(yàn)報(bào)告都需要下一個(gè)診斷意見,為臨床醫(yī)師提出細(xì)胞學(xué)診斷意見或可供臨床參考的意見。骨髓檢查診斷疾病的性質(zhì)一般分為明確診斷、符合診斷、提示性診斷和排出性診斷等,不同的血液病應(yīng)該以不同的方式下不同的診斷,這需要檢驗(yàn)人員具有較高的檢驗(yàn)技術(shù)、較豐富的臨床知識(shí)、以及將檢驗(yàn)結(jié)果與臨床資料相結(jié)合綜合分析的能力。對(duì)于初學(xué)者學(xué)生來說,確實(shí)有一定困難。如巨幼細(xì)胞性貧血、各種白血病,通過骨髓檢查可作出明確性診斷,缺鐵性貧血只能做出符合性診斷等。但通過反復(fù)實(shí)驗(yàn)、修改報(bào)告,反復(fù)講解相應(yīng)血液病的診斷要點(diǎn)后,學(xué)生可以基本掌握常見血液病的診斷方法。
2.1.8在報(bào)告文字描述中用一些口水話,寫錯(cuò)字、涂改字
骨髓檢驗(yàn)報(bào)告要求內(nèi)容簡(jiǎn)明扼要,突出重點(diǎn),使用書面、專業(yè)語言,而且不能有任何涂改痕跡,因此對(duì)學(xué)生報(bào)告中出現(xiàn)口水話、寫錯(cuò)字、涂改字等現(xiàn)象,筆者要求一定要改正,要求學(xué)生反復(fù)書寫、反復(fù)修改報(bào)告,直到滿意為止。并將作為平時(shí)成績(jī),納入學(xué)期考試總成績(jī)。
3.特別講解常用化學(xué)染色在常見血液病的診斷中的重要作用
常用化學(xué)染色有過氧化物酶染色(POX)、特異性酯酶染色(SE)、非特異性酯酶染色(α-NAE)及氟化鈉抑制實(shí)驗(yàn),鐵染色等。如POX、SE和α-NAE及氟化鈉抑制實(shí)驗(yàn)對(duì)常見急性白血病(急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病)的鑒別具有重要意義;鐵染色,對(duì)缺鐵性貧血診斷具有重要意義等。因此,要求學(xué)生在骨髓檢驗(yàn)報(bào)告單中,做了化學(xué)染色的,必須填寫化學(xué)染色結(jié)果。
4.強(qiáng)調(diào)血片檢查在骨髓檢驗(yàn)中的作用
許多血液病不僅骨髓象發(fā)生改變,而且血象也有相應(yīng)改變。如常見急性白血病,不僅骨髓象可見到大量原始、幼稚白血病細(xì)胞,血片中也可查到大量一般絕對(duì)見不到的異常原始、幼稚細(xì)胞。因此,血涂片的檢查和描寫對(duì)血液病的診斷也很重要,學(xué)生也需要重視。
骨髓檢驗(yàn)報(bào)告主要包括以下幾部分的內(nèi)容:骨髓象、血象、細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果、診斷意見及建議。筆者通過以上幾個(gè)方面的反復(fù)教學(xué),學(xué)生可在畢業(yè)前基本掌握常見血液病的骨髓檢驗(yàn)報(bào)告書寫方法,并正確下診斷,為學(xué)生將來服務(wù)社會(huì)奠定了良好基礎(chǔ)。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告12
一、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的特點(diǎn)
1.實(shí)錄性實(shí)驗(yàn)報(bào)告是實(shí)驗(yàn)研究工作的如實(shí)記錄。內(nèi)容包括整個(gè)實(shí)驗(yàn)的主要過程,如實(shí)驗(yàn)步驟、方法、實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。
2.科學(xué)性科技實(shí)驗(yàn)報(bào)告既可以描述創(chuàng)新的內(nèi)容,又可以記述重復(fù)實(shí)驗(yàn)的工作。另外,實(shí)驗(yàn)報(bào)告可以不要求具有明確的結(jié)論,只要對(duì)科學(xué)研究有參考或借鑒價(jià)值,無論結(jié)果是否達(dá)到預(yù)期要求,都可以寫成科學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
3.目的性以如實(shí)記載實(shí)驗(yàn)過程與結(jié)果為目的的所有科學(xué)實(shí)驗(yàn)工作都可以寫成科技實(shí)驗(yàn)報(bào)告
4.規(guī)范性一般的實(shí)驗(yàn)報(bào)告如分析報(bào)告、教學(xué)中的實(shí)(試)驗(yàn)報(bào)告、病理化驗(yàn)單等,內(nèi)容比較單一,而且項(xiàng)目固定,并按一定的格式印成表,由實(shí)驗(yàn)者根據(jù)要求逐項(xiàng)填寫;比較復(fù)雜的實(shí)驗(yàn),要按一定的格式寫成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,其寫作方法具有特定的規(guī)范性。
二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的種類
1.教學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告這類實(shí)驗(yàn)報(bào)告主要指理工科學(xué)生撰寫的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。重復(fù)科學(xué)技術(shù)史上前人已做過的實(shí)驗(yàn),目的是為了驗(yàn)證某一學(xué)科定律或結(jié)論,訓(xùn)練學(xué)生的動(dòng)手能力和表達(dá)能力。其實(shí)驗(yàn)步驟和方法一般是由教師自己擬定的,只不過是教學(xué)中的一個(gè)環(huán)節(jié)。這種實(shí)驗(yàn)報(bào)告通常印制成表格,由實(shí)驗(yàn)者逐項(xiàng)填寫。它是重復(fù)前人已做過的實(shí)驗(yàn),不具有學(xué)術(shù)價(jià)值。
三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式寫法
實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作格式主要包括以下幾個(gè)部分:
1.標(biāo)題即實(shí)驗(yàn)或試驗(yàn)項(xiàng)目的名稱。有時(shí)在項(xiàng)目之前加“關(guān)于”兩字。如“關(guān)于xxx的實(shí)驗(yàn)報(bào)告”。實(shí)驗(yàn)報(bào)告標(biāo)題要力求明確、醒目,集中映實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容。
2.摘要摘要是對(duì)報(bào)告內(nèi)容不加注釋和評(píng)論的簡(jiǎn)短陳述,內(nèi)容具有立性、自含性,即不閱讀報(bào)告的全文,就能獲得必要的信息。也供文摘等二次文獻(xiàn)采用。寫摘要要注意:一般應(yīng)說明實(shí)驗(yàn)的目的、方法、結(jié)果和最終結(jié)論等;一般不用圖、表、化學(xué)結(jié)構(gòu)式等;字?jǐn)?shù)一般不超過200字;位于正文之前。
3正文
(1)引言。引言部分應(yīng)是一系列間題的說明,如:研究的對(duì)象、實(shí)驗(yàn)的意義和作用;此前該項(xiàng)工作的發(fā)展概況以及存在的問題;本實(shí)驗(yàn)要達(dá)到的目標(biāo),等等。引言要使用概括性的語言敘述,較重要的地方才略作說明,而且點(diǎn)到為止。
(2)主體。
①實(shí)驗(yàn)原理。實(shí)驗(yàn)原理是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的理論依據(jù),因此,在寫作時(shí)要做到細(xì)致準(zhǔn)確。其內(nèi)容主要包括:簡(jiǎn)要介紹實(shí)驗(yàn)涉及的主要概念、主要定律、公式等。原理部分的文字應(yīng)做到簡(jiǎn)明、清晰,易懂。對(duì)于比較復(fù)雜和比較新穎的實(shí)驗(yàn),或者考慮到讀者并非都是專家的情況下,可以對(duì)實(shí)驗(yàn)所依據(jù)的理論作簡(jiǎn)要的說明。否則,原理部分可以省略
②實(shí)驗(yàn)設(shè)備和方法步驟。實(shí)驗(yàn)設(shè)備是實(shí)驗(yàn)報(bào)告中比較重要的部分。有關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)備應(yīng)說明其原理、結(jié)構(gòu)、型號(hào)、性能,若有自主設(shè)計(jì)制造的設(shè)備,還要附必要的圖紙和表格,另外還要敘述實(shí)驗(yàn)的條件和對(duì)實(shí)驗(yàn)的具體要求。
實(shí)驗(yàn)方法是實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒Φ谋匾獥l件之一。在寫作時(shí)要敘述得全面完整、準(zhǔn)確無誤。在說明實(shí)驗(yàn)裝置時(shí),一般按空間順序來表述,說明操作程序時(shí),般按時(shí)間順序來表述。
化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的試劑,應(yīng)標(biāo)明形態(tài)、濃度、成分等。③結(jié)果與討論。這部分是實(shí)驗(yàn)報(bào)告的主體,也是讀者最為關(guān)注的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容,應(yīng)力爭(zhēng)寫好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果一般都用專業(yè)術(shù)語表述,引用的數(shù)字要真實(shí),報(bào)告中的'圖表、數(shù)字要符合規(guī)范要求。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄失真,將使實(shí)驗(yàn)報(bào)告喪失科學(xué)價(jià)值。
討論就是從理論上對(duì)實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行分析、解釋,闡明結(jié)果的必然性。通常是分條進(jìn)行討論,要求簡(jiǎn)短,這也是實(shí)驗(yàn)報(bào)告與實(shí)驗(yàn)型論文的區(qū)別所在。報(bào)告討論的內(nèi)容可包括:對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行具體分析、說明影響實(shí)驗(yàn)的根本因素、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的適用范圍及與理論結(jié)果的差別等。
(3)結(jié)論即對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)評(píng)價(jià),同時(shí)逐條列出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。應(yīng)當(dāng)用簡(jiǎn)練、肯定的語言表達(dá),必要時(shí)可引用關(guān)鍵性數(shù)據(jù),但不再列圖表,不再提出新的事實(shí)、證據(jù)或材料。
4.致謝致謝是對(duì)實(shí)驗(yàn)中給予助的單位或個(gè)人表示感謝。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告的構(gòu)成并非千篇一律,由于實(shí)驗(yàn)有定性實(shí)驗(yàn)、定量實(shí)驗(yàn)、結(jié)構(gòu)分析實(shí)驗(yàn)、析因?qū)嶒?yàn)、對(duì)照實(shí)驗(yàn)、模擬實(shí)驗(yàn)等類型,因此,寫作時(shí)重點(diǎn)應(yīng)有所不同。以上六項(xiàng)構(gòu)成項(xiàng)目,只是實(shí)驗(yàn)報(bào)告的基本構(gòu)成內(nèi)容。
四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作要求
I.做好實(shí)驗(yàn)是前提要寫好實(shí)驗(yàn)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)前一定要熟悉實(shí)驗(yàn)原理、儀器設(shè)備、操作方法。在實(shí)驗(yàn)中,要按步驟操作,細(xì)心觀察現(xiàn)象,正確測(cè)取數(shù)據(jù),認(rèn)真做好記錄。
2.做好實(shí)驗(yàn)后的綜合與分析對(duì)實(shí)驗(yàn)過程中的各種現(xiàn)象以及最后的結(jié)果都要逐一分析,通過分析,揭示出其本質(zhì)的東西,這也是寫好實(shí)驗(yàn)報(bào)告的關(guān)鍵。并在此分析的基礎(chǔ)上進(jìn)一步綜合加工,才真正_卜升到理性認(rèn)識(shí),使理論與實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一起來。這一過程就是實(shí)驗(yàn)報(bào)告由起草到定稿的過程。
3.堅(jiān)持客觀嚴(yán)肅的寫作態(tài)度不經(jīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)不得修改數(shù)據(jù);在處理數(shù)據(jù)時(shí),遇到誤差分析和有效數(shù)字位數(shù)的問題,應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。
4.運(yùn)用準(zhǔn)確嚴(yán)密的表達(dá)方式
(1)充分利用圖表。圖表比文字?jǐn)⑹鲆庇^、簡(jiǎn)潔、明了。
(2)說明的準(zhǔn)確性、條理性。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的主要表達(dá)方式是說明,要求說明準(zhǔn)確,言之有序。即在說明物質(zhì)的性狀時(shí)要定性、定量;在說明實(shí)驗(yàn)設(shè)備、步驟和方法時(shí)要條理分明。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告13
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、掌握顯示細(xì)胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。
2、了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法
二、實(shí)驗(yàn)原理:
1、細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無需酶的`參加即可氧化為棕色化合物。
2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。
3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
細(xì)胞中過氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個(gè)方向涂布推開,室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。
5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿涂片為宜)
6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)
細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)與觀察吉姆薩染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min
6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。
吖啶橙染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min
4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結(jié)果與分析:
根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個(gè)視野的統(tǒng)計(jì),該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細(xì)胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制
細(xì)胞凋亡是一個(gè)受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動(dòng)自殺過程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控。
2、細(xì)胞凋亡的特征
凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細(xì)胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告14
醫(yī)學(xué)生物化學(xué)是一門為醫(yī)學(xué)院各專業(yè)開設(shè)的主干課程,是聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的重要學(xué)科,在醫(yī)學(xué)教學(xué)中具有重要作用。醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門可以自成體系,有其豐富的理論、技術(shù)內(nèi)容的課程,在醫(yī)學(xué)生物化學(xué)教學(xué)中占有突出的地位,它不僅可以以生動(dòng)形象的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象幫助學(xué)生加深掌握醫(yī)學(xué)生物化學(xué)的理論知識(shí),更重要的是讓學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)中的各種技術(shù)的基本原理,掌握常規(guī)實(shí)驗(yàn)儀器的主要性能與操作方法,培養(yǎng)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)問題、思考問題、分析問題和解決問題的能力。
一、傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的弊端
我們以前進(jìn)行的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn),其實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和考核方法都有弊端。
1.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容弊端。我們以前給學(xué)生開設(shè)的實(shí)驗(yàn)基本上都是驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),一般是理論課講述了相關(guān)知識(shí),接著安排這個(gè)知識(shí)點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)課。例如,理論課講述了蛋白質(zhì)的理化性質(zhì),這次實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容就為“蛋白質(zhì)的沉淀凝固”。課本上的理論都是前人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)于這樣的實(shí)驗(yàn)學(xué)生認(rèn)為缺乏挑戰(zhàn)性,實(shí)驗(yàn)操作中也不主動(dòng)思考。醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)太多,不能很好地發(fā)揮學(xué)生的主觀能動(dòng)性,也不利于學(xué)生思維能力和創(chuàng)造能力的培養(yǎng)。
2.考核方法的弊端。我們以前的醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)考核成績(jī)主要是學(xué)生的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,忽略了學(xué)生在寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的過程中存在抄襲現(xiàn)象。有的學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作能力很差,抄襲別人的實(shí)驗(yàn)報(bào)告也可得高分。這種考核標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)致學(xué)生不重視實(shí)驗(yàn)過程,只注重實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫,不利于培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,不利于培養(yǎng)學(xué)生分析問題和解決問題的能力。
二、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革
1.構(gòu)建新的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。對(duì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行改革。我們以前醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)與基本技能、蛋白質(zhì)的沉淀和凝固、雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量、還原糖含量的測(cè)定、氨基酸紙層析、尿淀粉酶活性的測(cè)定、血清尿素氮含量的測(cè)定、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳、DNA的提取與鑒定、丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的抑制作用等。改革后的實(shí)驗(yàn)內(nèi)為:蛋白質(zhì)含量的測(cè)定(考馬斯亮藍(lán)法)、氨基酸紙層析、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)、丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的抑制作用、葡萄糖含量的測(cè)定(葡萄糖氧化酶法)、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳、組織DNA的提取與鑒定、堿性磷酸酶提取與鑒定等。經(jīng)過對(duì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的改革,去掉部分淘汰實(shí)驗(yàn)和部分驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),增加了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)比例,增加了綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),就是在實(shí)踐教學(xué)中,教師提出實(shí)驗(yàn)的總體要求,讓學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。學(xué)生先進(jìn)行分組,實(shí)驗(yàn)小組的各成員經(jīng)過查閱文獻(xiàn)資料、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)所用試劑儀器、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟、進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)、制作幻燈片、小組課堂匯報(bào)這樣的程序完成整個(gè)綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)成功了,學(xué)生會(huì)有極大的成就感;如果有些實(shí)驗(yàn)不成功,帶教老師進(jìn)行引導(dǎo),分析失敗原因,再重復(fù)實(shí)驗(yàn)。這樣,每位學(xué)生在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中一直處于主體地位,避免了個(gè)別學(xué)生不動(dòng)手操作、抄襲實(shí)驗(yàn)報(bào)告等不良行為,從而達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí),以及學(xué)生的動(dòng)手、動(dòng)腦能力的目的。
2.自編生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材。我們以前所使用的實(shí)驗(yàn)教材有的內(nèi)容目前已淘汰,有的內(nèi)容不適合醫(yī)學(xué)生,因此,我們參考了周愛儒主編的《生物化學(xué)》,藥立波主編的《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》,趙亞華主編的'《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程》,劉吉民主編的《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》等,結(jié)合我校的實(shí)際情況,編寫了《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》實(shí)驗(yàn)講義。對(duì)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行精心的取舍,保留經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如葡萄糖含量的測(cè)定、氨基酸紙層析、血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳等外,增加了綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)如組織DNA的提取與鑒定、堿性磷酸酶的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)等的比例。這樣一方面學(xué)生可以掌握生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的分光技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)等基本實(shí)驗(yàn)技術(shù),另一方面通過綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力,提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。
3.讓學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)。傳統(tǒng)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)注重知識(shí)傳遞和操作能力的培養(yǎng)。上實(shí)驗(yàn)時(shí),老師先講實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟、可能出現(xiàn)的結(jié)果,準(zhǔn)備好試劑,調(diào)試好實(shí)驗(yàn)儀器,學(xué)生按部就班地操作即可,完全剝奪了學(xué)生的思維空間。讓學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn),學(xué)生可以全身心地投入到整個(gè)實(shí)驗(yàn)的各個(gè)準(zhǔn)備階段,例如試劑的配制、試劑的分裝、儀器的調(diào)試等,在準(zhǔn)備的過程中會(huì)出現(xiàn)各種問題,學(xué)生們?cè)诶蠋煹闹笇?dǎo)下就要去分析為什么會(huì)出現(xiàn)這些問題,如何去解決這些問題。學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)可以使學(xué)生獲得從書本上學(xué)不到的知識(shí)和能力,從實(shí)驗(yàn)中得到更多的收獲。
4.先做后講。我們以前的實(shí)驗(yàn)大多為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),一般是老師講完后學(xué)生再做,有時(shí)為了得到明確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果教師參與過多,學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)印象不深。為此,我們決定采用先做后講的歸納式教學(xué)方法,這種方法更適用于綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),讓學(xué)生一邊做實(shí)驗(yàn),一邊觀察討論,整個(gè)實(shí)驗(yàn)做完后,讓學(xué)生總結(jié)規(guī)律,老師只做歸納性、提高式講解。這樣的教學(xué)方法可以引導(dǎo)學(xué)生感知知識(shí)的發(fā)生過程,體驗(yàn)獲得真知的喜悅。
5.應(yīng)用多媒體技術(shù)豐富實(shí)驗(yàn)課教學(xué)。醫(yī)學(xué)生物化學(xué)這門課的知識(shí)很抽象,教師講課難度較大。多媒體技術(shù)通過文字、圖像、動(dòng)畫和聲音等傳遞信息。應(yīng)用多媒體技術(shù)進(jìn)行醫(yī)學(xué)生物化學(xué)的教學(xué),可以生動(dòng)、形象地傳遞較多的知識(shí),還可以幫助師生共同突破教學(xué)中的重點(diǎn)和難點(diǎn),極大地提高教學(xué)質(zhì)量。我們以前上實(shí)驗(yàn)課時(shí)都采用黑板板書,操作也只做一些簡(jiǎn)單的示范。由于班級(jí)人數(shù)較多,有一些學(xué)生看不到操作示范。現(xiàn)在我們把多媒體技術(shù)也運(yùn)用在醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課堂上,教師把實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)儀器、操作步驟等做成幻燈片,比板書看起來更清晰,把實(shí)驗(yàn)操作也錄成視頻,做實(shí)驗(yàn)前先看一段實(shí)驗(yàn)操作步驟的錄像,然后再操作,避免了學(xué)生看不到操作示范,這樣可提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力。
6.開放實(shí)驗(yàn)室。為了提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作能力,我們決定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室開放,便于學(xué)生進(jìn)行綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的預(yù)實(shí)驗(yàn)及學(xué)生參與教師科研的實(shí)驗(yàn)。
(1)帶教老師給學(xué)生講解一些常用實(shí)驗(yàn)儀器的使用方法及注意事項(xiàng),例如:電子天平、臺(tái)式低速離心機(jī)、超低溫離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、水浴箱、電泳儀、烤箱、手提式不銹鋼消毒器、分光光度計(jì)、PCR儀等。由實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員管理、維護(hù)實(shí)驗(yàn)室及其儀器。
(2)實(shí)驗(yàn)室開放時(shí)間:周一到周五從18∶00~22∶00,周六、周日全天開放。帶教老師和實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員輪流值班,隨時(shí)解決學(xué)生實(shí)驗(yàn)過程中的問題。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告15
考點(diǎn)提示:
(1)雞血能用豬血代替嗎?為什么?不能,因?yàn)椴溉閯?dòng)物的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,不能提取DNA.
(2)雞血中為何要加檸檬酸鈉?為何要棄去雞血細(xì)胞的上清液?
防止血液凝固;因?yàn)樯锨逡菏茄獫{,不含細(xì)胞和DNA.
(3)脹破細(xì)胞的方法?能用生理鹽水嗎?
向血細(xì)胞中加入蒸餾水,使細(xì)胞大量吸水而脹破;不能用生理鹽水,因?yàn)檠?xì)胞在蒸餾水中不能吸收水分。
(4)該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用玻璃燒杯還是塑料燒杯?為什么?用塑料燒杯,因?yàn)椴A菀孜紻NA.
(5)前后三次過濾時(shí),所用紗布的層數(shù)分別是多少?為什么?
第一次用一層紗布,有利于核物質(zhì)透過紗布進(jìn)入濾液;第二次用多層紗布,能防止DNA絲狀物透過紗布進(jìn)入濾液;第三次用兩層紗布,既有利于DNA透過紗布,又能防止其它雜質(zhì)透過紗布。
(6)若實(shí)驗(yàn)中所得黏稠物太少,其原因是什么?第一次加蒸餾水過少,細(xì)胞未充分脹破;第二次加蒸餾水過多或過少;第一次過濾用了多層紗布;第二次過濾用了一層紗布。
(7)兩次加入蒸餾水的目的分別是什么?
第一次是為了使血細(xì)胞吸水脹破;第二次是為了降低氯化鈉的濃度,有利于DNA有析出。
(8)實(shí)驗(yàn)中攪拌溶液時(shí),為何總要沿一個(gè)方向攪拌?防止DNA分子受到損傷。
(9)兩次析出DNA的方法分別是什么?原理分別是什么?
第一次是加蒸餾水,降低氯化鈉的濃度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因?yàn)镈NA不溶于酒精溶液。
(10)三次溶解DNA的液體分別是什么?原理分別是什么?
第一次、第二次都是用濃度為2mol/L的氯化鈉溶液,第三次用的是0.015mol/L(或2mol/L)的氯化鈉溶液。其原理是DNA在氯化鈉中的`溶解度,是隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí),DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化鈉溶液和0.015mol/L的氯化鈉溶液對(duì)DNA的溶解度都比較高。
(11)鑒定DNA時(shí)為何要用兩支試管?其現(xiàn)象分別是什么?
其中不加DNA的試管起對(duì)照作用。該試管溶液不變色,另一支加有DNA的試管溶液變藍(lán)色。
實(shí)驗(yàn)九探究酵母菌的呼吸方式
1、原理:酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸,產(chǎn)生二氧化碳和水:
C6H12O6+6O2+6H2O6→CO2+12H2O+能量
在無氧條件下進(jìn)行無氧呼吸,產(chǎn)生酒精和少量二氧化碳:
C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+少量能量
2、裝置:(見課本)
3、檢測(cè):(1)檢測(cè)CO2的產(chǎn)生:使澄清石灰水變渾濁,或使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。
(2)檢測(cè)酒精的產(chǎn)生:橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與酒精發(fā)生反應(yīng),變成灰綠色。
高一生物易錯(cuò)知識(shí)點(diǎn)
1.使能量持續(xù)高效的流向?qū)θ祟愖钣幸饬x的部分
2.能量在2個(gè)營養(yǎng)級(jí)上傳遞效率在10%—20%
3.單向流動(dòng)逐級(jí)遞減
4.真菌PH5.0—6.0細(xì)菌PH6.5—7.5放線菌PH7.5—8.5
5.物質(zhì)作為能量的載體使能量沿食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng)流動(dòng)
6.物質(zhì)可以循環(huán),能量不可以循環(huán)
7.河流受污染后,能夠通過物理沉降化學(xué)分解微生物分解,很快消除污染
8.生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu):生態(tài)系統(tǒng)的成分+食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng)
9.淋巴因子的成分是糖蛋白
病毒衣殼的是1—6多肽分子個(gè)
原核細(xì)胞的細(xì)胞壁:肽聚糖
10.過敏:抗體吸附在皮膚,黏膜,血液中的某些細(xì)胞表面,再次進(jìn)入人體后使細(xì)胞釋放組織胺等物質(zhì).
11.生產(chǎn)者所固定的太陽能總量為流入該食物鏈的總能量
12.效應(yīng)B細(xì)胞沒有識(shí)別功能
13.萌發(fā)時(shí)吸水多少看蛋白質(zhì)多少
大豆油根瘤菌不用氮肥
脫氨基主要在肝臟但也可以在其他細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行
14.水腫:組織液濃度高于血液
15.尿素是有機(jī)物,氨基酸完全氧化分解時(shí)產(chǎn)生有機(jī)物
16.是否需要轉(zhuǎn)氨基是看身體需不需要
17.藍(lán)藻:原核生物,無質(zhì)粒
酵母菌:真核生物,有質(zhì)粒
高爾基體合成纖維素等
tRNA含CHONPS
18.生物導(dǎo)彈是單克隆抗體是蛋白質(zhì)
19.淋巴因子:白細(xì)胞介素
20.原腸胚的形成與囊胚的分裂和分化有關(guān)
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